Determinazione dell'Acesulfame nelle Bevande Gassate mediante Cromatografia Liquida ad Alte Prestazioni Wayeal

L'acesulfame è un additivo alimentare con il nome chimico acesulfame di potassio, noto anche come zucchero A-K. Si presenta come una polvere cristallina bianca ed è un sale organico sintetico. Il suo sapore è simile a quello dello zucchero di canna. È facilmente solubile in acqua e leggermente solubile in alcol. È la quarta generazione di dolcificanti sintetici attualmente utilizzati nel mondo.

L'acesulfame è uno dei sei dolcificanti artificiali approvati. È 200 volte più dolce dello zucchero ma ha zero calorie. L'acesulfame è definito come dolcificante nello standard nazionale della Repubblica Popolare Cinese, lo Standard Nazionale di Sicurezza Alimentare — Standard per l'Uso degli Additivi Alimentari (GB 2760-2024). Lo standard stabilisce rigorose normative sui suoi livelli massimi di utilizzo e sui nomi dei prodotti alimentari a cui può essere aggiunto.

L'acesulfame è un dolcificante sostituto dello zucchero sintetizzato chimicamente. Rispetto al ciclamato di sodio, è meno dannoso per il corpo umano. Tuttavia, un'assunzione eccessiva di acesulfame può ancora avere effetti negativi sul tratto gastrointestinale, sul metabolismo e sulla dipendenza dalla dolcezza.

In questo esperimento, il contenuto di acesulfame in una determinata bevanda gassata è stato determinato utilizzando il cromatografo liquido ad alte prestazioni serie LC3400 di Wayeal, equipaggiato con un rivelatore UV, in conformità con GB 5009.140-2023 "Standard Nazionale di Sicurezza Alimentare — Determinazione dell'Acesulfame di Potassio negli Alimenti".

Parole chiave:Acesulfame, Dolcificante, Cromatografia liquida ad alte prestazioni.

1. Strumenti e Reagenti

1.1 Elenco di configurazione del cromatografo liquido ad alte prestazioni

Tabella 1 Tabella di configurazione dello strumento

1.2 Reagenti e Standard

Tabella 2 Elenco di reagenti e standard

1.3 Materiale sperimentale e attrezzature ausiliarie

Bilancia analitica;

Bagno a ultrasuoni;

Agitatore Vortex;

Centrifuga.

2. Metodo sperimentale

2.1 Preparazione dei reagenti

2.1.1 Soluzioni standard di lavoro: Trasferire con precisione 1,0 mL di soluzione standard di acesulfame (in acqua) in un matraccio tarato da 10 mL. Aggiungere una quantità appropriata di acqua per sciogliere, diluire fino al segno e mescolare bene per ottenere la soluzione madre standard (100 mg/L). Trasferire con precisione volumi appropriati della soluzione madre standard in matracci tarati separati di diverse capacità, diluire fino al segno con acqua e mescolare bene per ottenere soluzioni standard di lavoro a concentrazioni di 0,2 mg/L, 1,0 mg/L, 5,0 mg/L, 10,0 mg/L, 20,0 mg/L, 50,0 mg/L e 100,0 mg/L.

2.1.2 Soluzione di prova: Pesare accuratamente circa 5 g del campione di prova (degasare il campione mediante ultrasuoni per 5 minuti prima dell'uso) in una provetta centrifuga tappata da 50 mL. Aggiungere circa 20 mL di acqua, agitare con Vortex per mescolare, sottoporre a ultrasuoni per 20 minuti e centrifugare a 10.000 giri/min per 5 minuti. Trasferire il surnatante in un matraccio tarato da 50 mL. Aggiungere altri 20 mL di acqua alla provetta centrifuga, mescolare bene, sottoporre a ultrasuoni per 5 minuti e centrifugare a 10.000 giri/min per 5 minuti. Combinare il surnatante, diluire fino al segno con acqua e mescolare bene. Trasferire 5,00 mL dell'estratto in una colonna di estrazione in fase solida (SPE) di allumina neutra attivata e raccogliere l'eluato. Lavare la colonna SPE due volte con 2 mL di eluente ciascuna volta, raccogliere l'eluato, combinare i tre eluati e diluire a 10 mL con l'eluente, quindi mescolare bene. Filtrare attraverso una membrana microporosa da 0,45μm.

3. Risultati sperimentali

3.1 Linearità e intervallo

Tabella 3 Tabella di concentrazione della curva standard

Fig. 1 Curva standard di acesulfame

I risultati sperimentali mostrano che nell'intervallo di concentrazione da 0,2 a 100,0 mg/L per l'acesulfame, il coefficiente di correlazione lineare è superiore a 0,9999, indicando una buona linearità.

3.2 Precisione

Fig. 2 Cromatogramma sovrapposto della prova di standard di acesulfame (10,0 mg/L)

Tabella 4 Dati di prova di standard di acesulfame (10,0 mg/L)

I risultati sperimentali mostrano che per sei iniezioni consecutive della soluzione standard da 10,0 mg/L, la RSD di ripetibilità del tempo di ritenzione è dello 0,020% e la RSD di ripetibilità dell'area del picco è dello 0,316%, indicando una buona precisione dello strumento.

3.3 Test del campione

Fig. 3 Cromatogrammi sovrapposti di una determinata soluzione di prova di bevanda gassata

Calcolato con il metodo dello standard esterno, il contenuto di acesulfame in una determinata bevanda gassata è dello 0,0174%.

4. Conclusione

In questo esperimento, il contenuto di acesulfame in una determinata bevanda gassata è stato determinato utilizzando il cromatografo liquido ad alte prestazioni serie LC3400 di Wayeal, equipaggiato con un rivelatore UV, in conformità con GB 5009.140-2023 "Standard Nazionale di Sicurezza Alimentare — Determinazione dell'Acesulfame di Potassio negli Alimenti". I risultati sperimentali hanno mostrato che per sei iniezioni consecutive della soluzione standard da 10,0 mg/L, la RSD di ripetibilità del tempo di ritenzione è stata dello 0,020% e la RSD di ripetibilità dell'area del picco è stata dello 0,316%, indicando una buona precisione dello strumento. Nell'intervallo di concentrazione da 0,2 a 100,0 mg/L, il coefficiente di correlazione lineare è stato superiore a 0,9999, dimostrando una buona linearità. L'acesulfame è stato rilevato in una determinata bevanda gassata con un contenuto dello 0,0174%. Tutti i dati sopra riportati soddisfano i requisiti dello strumento specificati nel metodo standard.