Determinazione del contenuto di etilmaltolo nell'olio di soia mediante cromatografia liquida-spettrometria di massa tandem LCMS-TQ9200 Wayeal

Il maltol etilico è ampiamente utilizzato nell'industria alimentare come amplificatore e modificatore del sapore ad ampio spettro e altamente efficiente per intensificare e armonizzare le note dolci, fruttate e cremose nei prodotti alimentari.Secondo la norma nazionale cinese di sicurezza alimentare per l'uso di additivi alimentari (GB 2760-2024), è consentito l'uso di malto etilico a livelli appropriati in funzione delle esigenze di produzione in specifiche categorie di alimenti.

Tuttavia, poiché l'etil malto può mascherare efficacemente i profumi ossidativi degli oli e migliorare il loro sapore,negli ultimi anni sono stati ripetuti incidenti con l'aggiunta non autorizzata di olio vegetale commestibile, compreso l'olio di soia.e un metodo analitico efficiente per il monitoraggio dell'aggiunta illegale di etil maltol nell'olio di soia e in altri oli commestibili ha una notevole importanza pratica per garantire la sicurezza alimentare, tutelare i diritti dei consumatori e mantenere l'ordine del mercato.

L'olio di soia ha una composizione matrice complessa, costituita principalmente da trigliceridi, acidi grassi liberi, fosfolipidi e tocoferoli naturali.Questi componenti coesistenti possono causare significative interferenze della matrice durante l'analisi, influenzando gravemente il rilevamento dell' analito bersaglio, l' etil maltol.Cromatografia liquida - spettrometria di massa in tandem combina l'eccellente capacità di separazione della cromatografia liquida con l'alta selettività e alta sensibilità della spettrometria di massa in tandemQuesta tecnica è diventata uno strumento potente per l'analisi e l'identificazione di additivi illegali presenti nei prodotti alimentari.

Parole chiave:LCMS, olio di soia, etil maltol.

1Strumenti e reagenti

1.1 Elenco delle configurazioni del LCMS

Tabella 1 Elenco delle configurazioni degli strumenti

1.2 Reagenti e standard

Tabella 2 Tabella dei reagenti e degli standard

1.3 Materiali sperimentali e attrezzature ausiliarie

Pulizzatore ad ultrasuoni

Miscelatore a vortice

Centrifughe ad alta velocità

2Metodo sperimentale

2.1 Condizioni di cromatografia liquida

Colonna: C18, 1,7 μm, 2,1×50 mm

Fase mobile: A: 0,1% di acido formico in acqua; B: 0,1% di acido formico in metanolo

Ritmo di flusso: 0,3 ml/min

Temperatura della colonna: 40 °C

Volume di iniezione: 2μL

2.2 Metodo di pretrattamento

Pesare con precisione 10 g di campione (con precisione a 0,01 g) e trasferirlo in un tubo centrifugo in polipropilene da 50 ml. Aggiungere con precisione 10 ml di metanolo con una pipetta, vorticare per 2 minuti,e centrifugare a 9,000rpm/min per 10 minuti a 4°C. Trasferire il supernatante in un provettaio con tappo graduato da 20 ml. Ripetere l'estrazione dello strato di olio rimanente con altri 10 ml di metanolo,combinare i supernatantiLa soluzione viene filtrata attraverso una membrana microporousa (0,22 μm, fase organica) e utilizzata per l'analisi di cromatografia liquida-spettro di massa in tandem.

2.3 Preparazione della soluzione

2.3.1 Soluzione standard di malto di etilo: 100 μg/ml

2.3.2 Soluzioni di lavoro standard di etilamalto:Diluire gradualmente la soluzione di base standard di maltol etilico con metanolo per preparare soluzioni standard a concentrazioni di 1,25μg/mL, 2,5μg/mL, 5μg/mL, 25μg/mL e 50μg/mL.Pesare con precisione 10 g (con precisione fino a 0.01 g) di un campione negativo corrispondente al campione di prova, aggiungere 200 μl di ciascuna soluzione standard separatamente e trattare le miscele simultaneamente con i campioni di prova mediante estrazione.Successivamente si preparano le soluzioni di lavoro con concentrazioni finali di 12 mg/l..5ng/mL, 25ng/mL, 50ng/mL, 250ng/mL e 500ng/mL. Prepara queste soluzioni immediatamente prima dell'uso.

2.3.3 0,1% Soluzione acquosa di acido formico:Prendere 1 ml di acido formico e diluirlo fino a 1000 ml con acqua, filtrare attraverso una membrana (0,22 μm, fase acquosa) prima dell'uso.

2.3.4 Acido formico allo 0,1% in soluzione di metanolo:Prendere 1 ml di acido formico e diluirlo fino a 1000 ml con metanolo, filtrare attraverso una membrana (0,22 μm, fase organica) prima dell'uso.

3Risultato esperimento.

3.1 Cromatogramma standard

La determinazione del tenore di malto etilico è stata completata entro 7 minuti, con una buona forma di picco e una risposta del composto, soddisfacendo i requisiti dell'analisi sperimentale.

Figura 1 Cromatogramma di etilamalto (250 ng/mL)

3.2 Distanza lineare

La curva standard è stata preparata mediante diluizione seriale della soluzione standard di malto etilico.con deviazioni tra i risultati della rilevazione lineare e le concentrazioni note inferiori alla deviazione massima ammissibileTutti i valori di R2 hanno superato lo 0.9999, indicando un'eccellente linearità.

Tabella 3 Intervallo di linearità Tabella dei composti

Fig. 2 Risultati di linearità dei composti

3.3 LOD e LOQ

In questo metodo, il rapporto segnale/rumore (S/N) del maltol etilico a 12,5 ng/mL è significativamente superiore a 10.e S/N = 3 è definito come limite teorico di rilevamento (LOD)Il limite di rilevamento calcolato (LOD) è di 1,07 ng/ml e il limite di quantificazione (LOQ) di 3,56 ng/ml.

Tabella 4 LOQ e LOQ dei composti

Composto	Rapporto segnale/rumore (S/N)	Limite di rilevamento (ng/mL)	Limite di quantificazione (ng/mL)
Etil maltolio	35.079	1.07	3.56

Figura 3 Cromatogramma dei composti LOQ

3.4 Precisione

Prendere campioni di solvente in bianco e campioni negativi nella soluzione standard di etil maltol per preparare una concentrazione finale di 25 ng/mL e iniettarli consecutivamente per sette volte per valutare la precisione.I risultati sono illustrati nella tabella seguenteL'RSD dell'etil maltol era entro il 3%, soddisfacendo il requisito di precisione standard di ≤15%.

Tabella 5 Precisione dei composti

Composto	Campione	RSD
Etil maltolio	Metanolo aggiunto	2.407%
	Olio di soia spiccato	2.915%

Figura 4 Cromatogramma di precisione del campione con spicco di metanolo

Figura 5 Cromatogramma di precisione del campione di olio di soia

3.5 Tasso di recupero

Una soluzione standard di 100 μg/mL di maltol etilico è stata diluita con olio di soia a 25 ng/mL. Dopo pretrattamento, estrazione e filtrazione del campione,sono state eseguite sette iniezioni consecutive per confrontare i tassi di recuperoI risultati sono riportati nella tabella seguente: il tasso di recupero dell'etilmalto è stato del 102,53%, raggiungendo l'intervallo di recupero accettabile dell'80%-120%.

Tabella 6 Tasso di recupero dei composti

Composto	Concentrazione a picco (ng/mL)	Recupero (%)
Etil maltolio	25	102.53%

3.6 Residui in bianco

Dopo aver iniettato il punto più alto (500 ng/ml) della curva standard, è stato iniettato un reagente in bianco, senza rilevare alcun riporto in bianco dopo il calcolo.

Fig. 6 Cromatogramma dei residui bianchi

3.7 Prova del campione

Dopo il pretrattamento, è stato iniettato un campione di un certo marchio di olio di soia e non è stato rilevato alcun composto bersaglio.

Fig. 7 Cromatogramma di prova del campione

4Conclusioni

Questo metodo utilizza il sistema di spettrometria di massa a cromatografia liquida-tandem Wayeal® LCMS-TQ9200 per la determinazione del maltol etilico nell'olio di soia.I dati mostrano che i picchi cromatografici del metodo presentano una buona forma di picco senza codaI coefficienti di correlazione lineare sono tutti maggiori di 0.9999, la precisione è entro il 3% e i tassi di recupero dei picchi variano tra il 100% e il 105%.equipaggiato con il sistema Wayeal's LC-MS/MS, soddisfa i requisiti di routine di rilevazione qualitativa e quantitativa per l'analito bersaglio nei campioni.

TQ9200 Sistema di cromatografia liquida e spettrometria di massa (LC-MS/MS)

LC3400 Strumento di cromatografia liquida Hplc ad alta ripetibilità di iniezione 75MPa

42 MPa Sistema HPLC ad alta pressione isocratico nell'industria farmaceutica