Determinazione dei componenti di zucchero nelle colture oleaginarie mediante cromatografia ionica

Questo studio utilizza la cromatografia ionica per determinare il contenuto di fruttosio, glucosio, saccarosio, stachiosio e raffinosio nelle colture oleose.L'autore ha utilizzato un cromatografo agli ioni Wayeal dotato di un rilevatore amperometricoQuesto metodo è caratterizzato da un pretrattamento semplice, un eccellente recupero e un'elevata sensibilità, che lo rende adatto per la determinazione del fruttosio.,contenuto di glucosio, saccarosio, stachiosio e raffinosio nelle sementi oleose, come specificato nella norma.

Parole chiave: semi oleosi, cromatografia ionica, zuccheri.

1Strumenti e reagenti

1.1 Elenco delle configurazioni della cromatografia ionica

Tabella 1 Elenco delle configurazioni degli strumenti

1.2 Reagenti e soluzioni standard

Tabella 2 Tabella dei reagenti e degli standard

1.3 Materiale sperimentale e attrezzature ausiliarie

Configurazione della filtrazione

Pulizzatore ad ultrasuoni

Balanza analitica (precisione 0,0001 g)

Siringa usa e getta (2 ml)

Filtro per siringa acquosa (0,22 μm)

Acqua ultrapura, con una resistività di 18,2 MΩ·cm (25°C)

2Metodo sperimentale

2.1 Preparazione della soluzione

2.1.1 Soluzione di acetato di zinco (1 mol/l): pesare 21,9 g di acetato di zinco, aggiungere 3 ml di acido acetico glaciale, sciogliere e diluire fino a 100 ml con acqua.

2.1.2 Soluzione di ferrocianuro di potassio (1 mol/l): pesare 10,6 g di ferrocianuro di potassio, sciogliere e diluire fino a 100 ml con acqua.

2.1.3 Soluzione di idrossido di sodio (200 mmol/L): misurare 10,5 ml di soluzione al 50% di idrossido di sodio, diluirla a 1000 ml con acqua pre-disgassata e proteggerla con gas azoto.

2.2 Pretrattamento del campione

2.2.1 Estrazione del campione

Pesare 5 g di campione (con una precisione di 0,1 mg), inserirlo in un tubo centrifugo da 50 ml con tappo, aggiungere 25 ml di petrolio, vorticare per 1 minuto, centrifugare a 2000 r/min per 5 minuti,e scartare lo strato superiore di etere di petrolioRipetere due volte i passaggi di cui sopra. Evaporare l'etere di petrolio residuo in un bagno d'acqua a 60°C. Trasferire il campione in un pallone conico da 150 ml (precedentemente portato a peso costante) con una barra di vetro.Sciacquare due volte il tubo di centrifugazione con 50 ml di acquaAggiungere lentamente 5 ml di soluzione di acetato di zinco e 5 ml di soluzione di ferrocyanuro di potassio, rispettivamente.aggiungere acqua fino a quando la massa totale della soluzione non è di circa 100 g (con una precisione di 1 mg). Dopo aver mescolato a temperatura ambiente per 30 minuti, filtrare la soluzione attraverso carta filtrante rapida qualitativa.Contemporaneamente, eseguire una prova in bianco.

2.3 Condizioni sperimentali

2.3.1 Condizioni di cromatografia

Fase mobile: A: 200mM NaOH; B: acqua; C: 20mM NaOH

Ritmo di flusso: 0,4 ml/min

Tempo di funzionamento: 65 minuti

Temperatura della colonna: 30°C

Temperatura della zona di rilevamento: 30°C

Elettrodo d'oro, zuccheri, potenziale quadruplo.

Volume di iniezione: 10 μl

Tabella 3 Eluzione del gradiente

3Risultato esperimento.

3.1 Cromatogramma standard

La separazione di cinque zuccheri è stata completata in 20 minuti, con tutti i picchi che mostrano una buona forma, senza fenomeni di coda e tutti i composti che mostrano una risposta eccellente,che soddisfano i requisiti per la determinazione sperimentale.

Fig. 1 Cromatogramma di 5 zuccheri (0,5 mg/l)

Tabella 4 Risultati di idoneità del sistema

3.2 Distanza lineare

Prendere una quantità adeguata di soluzione standard miscelata e effettuare una diluizione seriale per preparare una serie di concentrazioni per la costruzione della curva standard.La deviazione tra i risultati della rilevazione lineare e le concentrazioni note è inferiore alla deviazione massima ammissibileI valori di R2 vanno da 0,99985 a 1.00000, che indica un'eccellente linearità per tutti i componenti.

Tabella 5 Tabella dell'intervallo lineare per ogni composto

Fig. 2 Risultati lineari per cinque zuccheri

3.3 Precisione

La soluzione del campione di soia è stata estratta secondo il punto 2.2.1 e analizzati alle condizioni strumentali specificate al punto 2.3.1 con sei iniezioni consecutive. I risultati sono riportati nella tabella seguente. Le deviazioni standard relative (RSD) dei cinque zuccheri nel campione di soia erano tutte entro l'1%Il rilevamento del campione è affidabile, e il metodo dimostra una buona precisione.

Tabella 3 Risultati di precisione dei campioni di soia

Fig. 3 Cromatogrammi sovrapposti di quattro zuccheri Precisione nella soia

3.4 Risultato della prova del campione

3.4.1 Detezione dell'umidità

Prendere i campioni di soia e di sesamo da sottoporre a prova e determinare il tenore di umidità dei campioni in conformità a GB/T 14489.1I risultati sono illustrati nella tabella seguente.

Tabella 4 Risultati dell'umidità del campione

3.4.2 Esame dei campioni

Prendere i campioni di soia e di sesamo da analizzare, estrarre le soluzioni del campione secondo il punto 2.2.1, e effettuare l'analisi dell'iniezione alle condizioni strumentali specificate al punto 2.3.1I risultati dei test sul campione sono riportati nella tabella seguente: il rilevamento dei campioni di soia e di sesamo è affidabile e i risultati sono soddisfacenti.

Tabella 5 Risultato delle prove sul campione

Fig. 4 Cromatogramma di prova del campione di soia diluito 200 volte

Fig. 5 Cromatogramma di prova del campione di sesamo diluito 100 volte

4Conclusioni

Questo metodo utilizza un sistema di cromatografia ionica Wayeal della serie IC6300 dotato di un rilevatore amperometrico per stabilire un metodo cromatografico ionico per la determinazione di fruttosio, glucosio,zuccheroI campioni sono stati trattati mediante pretrattamento, separati mediante una colonna di cromatografia ionica e quantificati utilizzando il metodo standard esterno.che consentono l'analisi qualitativa e quantitativa del fruttosio, glucosio, saccarosio, stachiosio e raffinosio nelle sementi oleaginee.la sensibilità soddisfa i requisiti delle norme nazionali, e i coefficienti di correlazione lineari sono tutti superiori a 0.999Ciò dimostra che il metodo, unito al sistema di cromatografia ionica di Wanyeal, soddisfa i requisiti di routine di rilevazione qualitativa e quantitativa dei campioni bersaglio.