Determinazione del polietilene glicolo mediante cromatografia a gel permeazione
1Introduzione
Oggetto: determinazione del peso molecolare e della distribuzione del polietilene glicolo (PEG) mediante metodo di cromatografia per permeazione a gel ad alte prestazioni (GPC).
Metodo:
Xtimate SEC-120, colonna di cromatografia per permeazione al gel da 5 μm, 7,8x300 mm
Detettore di indice di rifrazione differenziale (RID)
Fase mobile: acqua ultrapura
Velocità di flusso: 1,0 ml/min
temperatura della colonna: 35 °C;
Volume di iniezione: 10 μl.
Le curve di taratura sono stabilite e i risultati del peso molecolare e della distribuzione di ciascun campione sono calcolati con il software GPC.
Risultato: la linearità del PEG è buona quando il peso molecolare è nell'intervallo 400-20000. La riproducibilità dell'esperimento è buona, con 6 iniezioni consecutive di PEG6000,il valore RSD del tempo di ritenzione è 0.0,105% e il valore RSD dell'area di picco è 0,335%.
Conclusione: la cromatografia per permeazione a gel ad alte prestazioni (GPC) è un metodo affidabile per la determinazione del peso molecolare e della distribuzione del PEG,che ha i vantaggi di una precisione e di un'elevata riproducibilità quando viene utilizzato per valutare la proprietà di polidispersità dei composti polimerici.
Parole chiave: HPLC, GPC, RID, polimero, polietilene glicolo
2Metodo sperimentale
2.1 Configurazione dello strumento
Tabella 1 Elenco delle configurazioni dei cromatografi liquidi ad alte prestazioni
| - No, no. |
Modulare |
Quota |
| 1 |
Cromatografia liquida ad alte prestazioni serie LC3200 |
1 |
| 2 |
PB3200 Pompa binaria |
1 |
| 3 |
RID3300 |
1 |
| 4 |
CT3200 Forno a colonna |
1 |
| 5 |
AS3200 Autosampler |
1 |
2.2 Condizioni di prova
Colonna di cromatografia: Xtimate SEC-120,5μm,7.8x300mm
Temperatura della colonna: 35°C
Detettore: RID
Tasso di flusso: 1,0 ml/min
Fase mobile: acqua
Volume di iniezione: 10μL
2.3 Strumento/Reagenti e materiali di consumo
Reagenti:
Acqua ultrapura
Standard: PEG400; PEG2000; PEG6000; PEG10000; PEG20000
Equipaggiamento ausiliario
Balanze analitiche
Unità di estrazione dei solventi
Pulizzatore ad ultrasuoni
Materiali sperimentali
Membrana filtrante: membrana filtrante acquosa di 0,45 μm
2.4 Preparazione dello standard PEG
Pipetta 0,20 g ciascuno per le norme PEG400, PEG2000, PEG6000, PEG10000 e PEG20000, aggiungere 10 ml di acqua da sciogliere, mescolare bene e preparare la concentrazione dei campioni da testare di 20 mg/ml.
3Risultati e discussione
3.1 Diversi standard di peso molecolare
Figura 1 Cromatogramma di PEG400
Tabella 1 Parametri cromatografici del PEG400
| - No, no. |
Composti |
Tempo di conservazione |
Area di picco |
Numero della targa teriale |
Fattore di trazione |
| 1 |
PEG400 |
10.315 |
501.732 |
2346 |
1.185 |
Fig. 2 Cromatogramma di PEG2000
Tabella 2 Parametri cromatografici del PEG2000
| - No, no. |
Composti |
Tempo di conservazione |
Area di picco |
Numero teorico della targa |
Fattore di trazione |
| 1 |
PEG2000 |
8.659 |
499.892 |
1926 |
1.230 |
Figura 3 Cromatogramma di PEG6000
Tabella 3 Parametri cromatografici del PEG6000
| - No, no. |
Composti |
Tempo di conservazione |
Area di picco |
Numero teorico della targa |
Fattore di trazione |
| 1 |
PEG6000 |
7.215 |
499.482 |
|
1.171 |
Fig. 4 Cromatogramma di PEG10000
Tabella 4 Parametri cromatografici di PEG10000
| - No, no. |
Composti |
Tempo di conservazione |
Area di picco |
Numero teorico della targa |
Fattore di trazione |
| 1 |
PEG10000 |
6.612 |
483.657 |
2550 |
1.265 |
Figura 5 Cromatogramma di PEG20000
Tabella 5 Parametri cromatografici del PEG20000
| - No, no. |
Composti |
Tempo di conservazione |
Area di picco |
Numero teorico della targa |
Fattore di trazione |
| 1 |
PEG20000 |
6.081 |
497.803 |
1103 |
1.799 |
Fig. 6 Cromatogrammi sovrapposti di peso molecolare diverso
Nota: i dati di cui sopra mostrano che il tempo di ritenzione di PEG20000 è di 6.081 minuti e di PEG400 di 10.315 minuti, le molecole più grandi vengono elute prima e le molecole più piccole successivamente.
3.2 Ripetibilità
Figura 7 Cromatogrammi di sovrapposizione di ripetibilità di PEG6000 (n=6)
Tabella 7 Parametri cromatografici di ripetibilità di PEG6000 (n=6)
| - No, no. |
Campioni |
Tempo di conservazione |
Area di picco |
| 1 |
6000 |
7.233 |
498.821 |
| 2 |
6000 |
7.234 |
503.367 |
| 3 |
6000 |
7.225 |
499.891 |
| 4 |
6000 |
7.221 |
499.560 |
| 5 |
6000 |
7.219 |
501.374 |
| 6 |
6000 |
7.215 |
499.482 |
| Media |
- |
7.225 |
500.416 |
| RSD (%) |
- |
0.105 |
0.335 |
Nota: la ripetibilità è buona, il RSD del tempo di ritenzione è dello 0,105% e il RSD dell' area di picco dello 0,335% per 6 iniezioni di PEG6000.
3.3 Curve standard
Fig. 8 Curve standard cromatogrammi di diversi pesi molecolari
Tabella 8 Curve standard Parametri cromatografici di diversi pesi molecolari
Nota: i risultati del peso molecolare e della distribuzione di ciascun campione sono calcolati da un software GPC.000, e il coefficiente di correlazione lineare è 0.999.
4Conclusioni
Questa prova del polietilene glicolo (PEG) è eseguita mediante cromatografia in gel utilizzando un cromatografo liquido ad alte prestazioni della serie LC3200 con rilevatore di indice di rifrazione differenziale.il tempo di ritenzione di PEG20000 è di 6.081 minuti, e il PEG400 è di 10.315 minuti, le molecole più grandi vengono elute prima e le molecole più piccole vengono elute in seguito.105% e la RSD dell'area di picco è 0.335% per 6 iniezioni di PEG6000.000, e il coefficiente di correlazione lineare è 0.9999La cromatografia per permeazione a gel ad alte prestazioni (GPC) è un metodo affidabile per la determinazione del peso molecolare e della distribuzione del PEG.che ha i vantaggi di risultati accurati e riproducibili quando viene utilizzato per valutare la proprietà di polidispersità dei composti polimerici.
Nota: il campione deve essere lasciato a temperatura ambiente per più di 12 ore e deve essere mescolato con delicatezza, non usare ultrasuoni o agitare con forza per accelerare la dissoluzione.
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